En automóvil
Se puede acceder en automóvil a cualquiera de los cinco Centros de Visitantes de las provincias de Sevilla, Huelva o Cádiz.

El acceso al Centro de Visitantes José Antonio Valverde se realiza a través de pistas sin asfaltar que suelen estar en buen estado la mayor parte del año.

Desde Sevilla: se toma la autopista A-49 hacia Huelva. Se abandona en la salida de Bollullos Par del Condado/ La Palma. Desde allí, se toma la carretera A-483 que lleva hacia Almonte, El Rocío y Matalascañas. Asimismo, se puede tomar en la A-49, la salida de Hinojos/Chucena, se toma la carretera A-481 hacia Hinojos y de allí la A-484 que lleva hacia Almonte, y desde allí la A-483 hacia El Rocío y Matalascañas.

Desde Huelva: se toma la carretera A-494 que lleva hacia Matalascañas. En Matalascañas, la carretera A-483 lleva hacia El Rocío.

Desde Sevilla o Cádiz: es posible llegar hasta Sanlúcar de Barrameda por las carreteras A-471 (desde Lebrija) y A-480 desde (Jerez de la Frontera)

En transporte Público: Autobús:
Se puede acceder a los Centros de Visitantes de "La Rocina" y "El Acebuche" que se encuentran en término municipal de Almonte (Huelva), por medio del servicio que ofrece la empresa de autobuses Damas S.A. 954 907737.

Para acceder al Centro de Visitantes "Fábrica de Hielo" en autobús deberá llegar al municipio de Sanlúcar de Barrameda (Cádiz) con cualquiera de las dos empresas siguientes:

• La Valenciana: 956360191
• Los Amarillos: 956360466

No es posible acceder a los Centros de Visitantes José Antonio Valverde (Aznalcázar) a y "Palacio del Acebrón" a través de transporte público. El Centro de Visitantes “El Acebuche” se encuentra a unos 2 km de la parada del autobús.

En Bicicleta:
No existen áreas especialmente diseñadas para el acceso en bicicleta en el Parque Nacional, sin embargo, la cercanía de la mayor parte de los Centros de Visitantes a zonas urbanas permite el uso de este medio de transporte como alternativa al coche.

El acceso en bicicleta al Centro de Visitantes José Antonio Valverde (Aznalcázar) desde Villamanrique de la Condesa, Puebla del Río e Isla Mayor (antes Villafranco del Guadalquivir), es el mismo que en coche, de unos 25 kilómetros, sólo ida. Es aconsejable informarse previamente del estado de las pistas.

Acceso a pie:
Sólo está permitido transitar a pie libremente por los 33 kilómetros de playa del Parque Nacional, entre Sanlúcar de Barrameda y Matalascañas. El Parque Nacional dispone asimismo de una red de senderos peatonales de acceso libre (ver información en apdo. 4 Instalaciones y Servicios).